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使用凱氏定氮儀的流程一共有幾步?

更新時(shí)間:2021-04-25 點(diǎn)擊次數(shù):1459
  凱氏定氮儀作為測定蛋白質(zhì)的儀器,廣泛應(yīng)用于乳與乳制品中蛋白質(zhì)的含量的測定。凱氏定氮儀具有高靈敏度,分析速度快,應(yīng)用范圍廣,所需試樣少,設(shè)備和操作比較簡單等特點(diǎn) 它是目前使用很廣泛測定乳與乳制品中蛋白質(zhì)的儀器。
  凱式定氮儀的使用流程
  1.1 開機(jī)之前
  保證各個(gè)溶液能夠滿足此次試驗(yàn)測定,檢查去離子水,堿液和接收液的使用情況,以及廢液桶中廢液得到了及時(shí)的清理。如果在去離子水,堿液和接收液的液位低于液位傳感器的話,或廢液的液位高于液位傳感器的話,儀器將報(bào)警,正在進(jìn)行的試驗(yàn)將被停止,影響測定工作的正常進(jìn)行。
  1.2 開機(jī)之前,保證冷卻水的開關(guān)是打開了。
  如果冷卻水開關(guān)關(guān)閉,儀器雖然能自檢通過,但是在蒸餾過程中,由于蒸餾裝置的溫度太高,儀器將報(bào)警,提示打開冷卻水開關(guān)。打開冷卻水開關(guān)后,儀器將繼續(xù)工作。但此次試驗(yàn)被停止,影響正常測定的同時(shí),在沒有冷卻水保護(hù)的情況下,對蒸餾裝置具有損傷。
  1.3 等1.1和1.2確認(rèn)無誤后開機(jī),儀器自檢,自檢通過后,儀器進(jìn)入等待選擇程序階段。
  首先進(jìn)入手動(dòng)模式對滴定器中的氣泡進(jìn)行排除。氣泡的存在會(huì)影響測定結(jié)果,因?yàn)闅馀葸M(jìn)入后,會(huì)占據(jù)標(biāo)準(zhǔn)滴定酸的體積,使標(biāo)準(zhǔn)滴定酸的體積減小,測定結(jié)果偏低。
  排除氣泡的方法是;首先打開儀器前蓋,儀器報(bào)警,提示儀器前蓋被打開,找一塊小磁鐵放在儀器前面的觸點(diǎn)上,按面板上回車鍵,此時(shí)儀器默認(rèn)前蓋關(guān)閉。將儀器功能選擇滴定器充液,滴定器活塞向上移動(dòng)停止后,用收捏住滴定器的塑料軟管,選擇滴定器排空,滴定器活塞向下移動(dòng),等移動(dòng)3~5秒后立刻松手,滴定器中氣泡將上浮至滴定器上端,選擇滴定器充液,氣泡被排除滴定器,反復(fù)2~3次,將氣泡排凈后開始測定。
  1.4 空白的測定
  在空白測定時(shí),首先測定水空白,水空白的測定是為了檢查儀器的穩(wěn)定程度。當(dāng)前后兩次空白測定值小于0.05且水空白值小于0.2時(shí),儀器穩(wěn)定。測定試劑空白,并將空白值輸入儀器。如果不先測定水空白而直接測試劑空白,即在儀器不穩(wěn)定的情況下就進(jìn)行試劑空白的測定,將會(huì)得到偏高的試劑空白值,測定結(jié)果將偏低。
  1.5樣品測定
  1.5.1稱樣
  牛乳樣品需要混合均勻后取樣,因?yàn)榕H闃悠啡菀字旧细?,不事先混合而直接從上層取樣的話,測定結(jié)果將偏低。乳粉樣品混合均勻后用稱量紙稱量,并用鑷子送如消化管底部。因操作不當(dāng)殘留在管壁上的樣品,在加入硫酸的時(shí)候用硫酸沖入消化管底部。如果殘留在管壁上而不用硫酸沖入的話,將會(huì)使測定結(jié)果偏低。
  1.5.2消化
  在加酸的過程中,要考慮到樣品的組成對消耗酸量的影響。酸量小,樣品消化不*,測定結(jié)果偏低;酸量大,在上機(jī)過程中與堿中和后酸過量,游離胺不能被蒸餾出來,嚴(yán)重影響測定結(jié)果。所以,要嚴(yán)格控制硫酸的用量。
  1.6回收率的測定
  采用硫酸銨和尿素分別對回收率進(jìn)行測定。單純的采用硫酸銨,簡單快速,不需要消化,但只能保證儀器測定的部分,而不能對前處理的消化過程進(jìn)行質(zhì)量體系保證。尿素需要消化進(jìn)行測定,對前處理和儀器測定部分全程進(jìn)行質(zhì)量保證。
  為了使凱氏定氮儀保持良好的靈敏度和穩(wěn)定性,能高效,快速的分析樣品,得到準(zhǔn)確的分析結(jié)果,平時(shí)使用時(shí),應(yīng)注意保持儀器各個(gè)部件的正常,開機(jī)前仔細(xì)檢查一下,確認(rèn)無誤后開機(jī)測定。

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